 大量实验和临床研究都证明针刺手厥阴心包经穴对心肌有很好的保护作用。本项研究在已有的实验基础上，观察了针刺对心肌缺血一再灌注损伤大鼠心肌细胞能量代谢物质三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(AI)P)和一磷酸腺苷(AMP)变化的影响，以探讨针刺抗再灌注损伤的作用机理，为临床应用提供实验依据。
l材料与方法
I．1实验动物及分组Wistar大鼠50只，清洁级，体重250—280g，雄性，由山西省中医药研究院动物中心提供。
1．2模型制备10％乌拉坦(1mg／kg)腹腔麻醉，接动物人工呼吸机，第3、4肋间隙处开胸，暴露心脏，冠状动脉左前降支根部用无创性小圆针穿零号医用缝合线，心电图监测，穿线处置一硅胶管结扎左前降支，以左室前壁发绀并向外膨胀及心电图S-T段抬高为标志。关闭胸腔，40分钟后开胸，剪开硅胶管，恢复左前降支灌流，60分钟后摘取心脏，取心室肌，液氮中冻存。
1．3分组及处理50只动物随机分为5组：假手术组、缺血—再灌注模型组、针刺内关治疗组、针刺郄门治疗组、针刺支沟对照组。每组10只动物。假手术组：只冠状动脉左前降支根部穿线；针刺内关治疗组：取双侧内关穴，G6805—1型治疗仪疏密波电针20分钟，频率30一100Hz，强度20一30v，以前肢出现与电针频率相一致的轻微颤动为准，去电针。心电图监测，结扎左前降支40分钟，电针内关20分钟，再灌注60分钟。内关穴定位采取拟人比照法。针剌郄门治疗组、针刺支沟对照纽与针刺内关治疗组方法相同。
1．4仪器与试剂 日本岛津Lc一10TVP型高效液相色谱仪,SPD一10b．VP紫外检测器，N--2000双通道色谱工作站。5’一ATP钠盐、5’一ADP钠盐、5’一AMP钠盐：Sigma公司。甲醇：天津四友，色谱纯。KH2 PO4、KOH、HCLO4产分析
纯。
1．5色谱条件C18柱(150×4．60mm)，流动相为50mml／L的磷酸盐缓冲液(150mmol／LKH2 PO4:150mmolKCL,pH6.0),流速0．5ml／min，柱温为室温30℃，检测波长254nm，进样量20μI。
1．6指标测定测定时取出心肌组织加入预冷的匀浆介质在冰浴中制成匀浆液，高效液相色谱仪检测3种物质含量。
1．7统计方法各组数据以均数±标准差(x±s)表示，进行方差分析。全部数据输入计算机用sAs8．O软件进行处理。
2结果见附表。
附表 各组大鼠心肌组织ATP,ADP和AMP含量的比较.
3讨论
ATP是由组织细胞合成的含高能磷酸键的物质，是细胞重要的能量来源，也是体内重要的辅酶。参与体内脂肪、蛋白．质、糖及核苷酸代谢。当机体吸收、分泌、肌肉收缩及进行生化合成反应需要能量时，ATP郾分解成ADP和磷酸基，同时释放出能量。心脏产生和储存的ATP约有60％一80％用于机械收缩活动，约15％用于膜系统的主动传递作用，余下的部分用于起搏传导系统以及线粒体等处的各种合成代谢。ATP不仅是心肌收缩的直接能源，而且是生物膜系统中许多主动过程的动力，如生物膜系统上的“钠泵”(Na+一K+一ATPase)和“钙泵”(Ca+一ATPase)运转都需要消耗ATP。
心肌缺血时代谢受到严重影响。ATP下降的程度和心肌酶的释放成正比。ATP在缺氧初期，下降并不明显，下降明显的是作为心肌能量储备的磷酸肌酸，至30分钟后ATP下降60％。当缺血时间延长，超过心肌能量储备时，表现为ATP明显下降，伴有ADP和AMP的升高。心肌缺血期，有氧代谢受到抑制，无氧酵解变成ATP产生的重要来源。当酵解产生的ATP不足时，离子平衡将受到影响。缺血后10—20分钟细胞内ca2+开始升高。大鼠心肌缺血15～20分钟后，肌浆网和线粒体膜Ca2+一ATPase活性受到抑制，肌浆网和线粒体不能有效地对胞质内cc2+缓冲作用。若缺血时间延长，再灌注时，细胞膜可发生破裂，而Ca2+还可以通过破裂的心肌纤维膜进入细胞。Ca2+浓度增高，除引起细胞膜损伤外，还通过激活磷脂酶而降解膜磷脂，激活ca+一AT-Pase，增加ATP消耗，同时又损伤线粒体功能，致ATP产生障碍，降低ATP含量。如此循环，导致细胞严重损害，细胞内高Ca+通过ATP降解及激活磷脂酶等途径，加速了自由基的产生，引起脂质过氧化。大量自由基产生及钙超载破坏了心肌细胞结构，影响了膜离子的正常转运，导致了心肌缺血再灌注损伤的发生。
以往的实验研究证实，心肌缺血再灌注时，细胞内ca2’超载和氧自由基大量产生，针刺手厥阴经穴可起到明显抑制作用。本项研究结果显示。缺血再灌注模型组ATP含量明显降低，同时伴有ADP,AMP的升高，说明在缺血再灌注过程中，心肌能量代谢受到严重影响；针刺内关治疗组与针刺郄门治疗组三种物质的含量均发生变化，尤以ATP含量变化最为显著；针刺支沟对照组三种物质无明显变化。说明针剌手厥阴经穴可有效地保护心肌的有氧代谢，减少自由基的产生，抑制细胞内ca+超载，从而降低了心肌缺血再灌注损伤的程度。
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