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蝉花对免疫功能影响的实验研究
 
栏目:药学理论  加入时间:2007-5-10 12:01:36  来源:中国中医药科技  浏览:1526   发布投稿

蝉花为麦角菌科真菌大蝉草Cordyceps cicadae shing寄生在蝉科昆虫山蝉Cicda flammata Dist若虫上的子座及若虫尸体的复合体。味甘性寒,具有疏散风热、定惊镇痉、明目透疹、滋补强壮之功效。现代研究表明其有抗肿瘤作用。本文对蝉花进行了免疫功能实验和急性毒理试验。现报告如下。

l材料

11动物ICR小鼠,体重均为(20±2)g♂♀各半,由浙江中医药大学实验动物中心提供,动物饲养合格证号SYXK()2003O003号。实验室温度(24±2)℃,相对湿度(65±5)%,饲以常规饲料,自由饮水。

12药品及试剂蝉花提取液:蝉花(采自杭州灵隐地区,经浙江省药检所鉴定,为Cordycepscicadaee.属正品)打粗粉,水煎取汁过滤浓缩制成浸膏,1g相当于生药3988,实验时用蒸馏水配成所需浓度药液。双宝素口服液:安徽省黄山市徽州制药厂产品,批号030910。环磷酰胺:上海华联制药有限公司,批号031119。丙酮:杭州双林化工试剂厂,批号20030620。甲醇:上海振兴化工一厂,批号200406002。鸡红

细胞悬液:浙江中医药大学实验动物中心。

13仪器HWS270恒温恒湿箱;AB204N电子分析天平;722型可见分光光度计;Nikoa E-600显微镜。

2方法

21对鸡红细胞致小鼠溶血素抗体形成的影响

    取小鼠40只,按性别随机分成4组,每组♀♂5只,分笼饲养,每鼠先ip5%生理盐水鸡红细胞混悬液02mi进行免疫,空白组ig等容量蒸馏水,蝉花大、小剂量组蝉花药液(1836gkg),阳性对照组ig双宝素(88g/kg),每天1次,连续7天。末次给药后2小时,摘眼球取血,离心,取血清用生理盐水稀释100倍,取稀释血清lml,与5%鸡红细胞悬液05ml10%补体05ml混合,在37℃恒温箱中保温30分钟后,0℃冰箱中中止反应,离心,取上清液于540mm处比色,以光密度(OD)读数作为判定血清溶血素的指标比较各组的蒡异。

22对抗体积数的影

    取小鼠40只,按性别分成4组,分组及给药同21。每日1次,连续5天,给药第l天同时腹腔注射鸡红细胞(CRBC),第6天眼眶取血,分离血清,用生理盐水倍比稀释,将不同稀释浓度的血清分别置于微量凝集板内,再加入红细胞悬液,37'E孵化3小时,观察凝集程度,计算抗体积数。

23对腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响

    取小鼠40只,分组给药同21。末次给药后2小时,每鼠腹腔注射5%鸡红细胞悬液04ml6小时后将小鼠脱颈处死,腹腔注射生理盐水2ml,轻柔腹部后,剪开腹腔皮肤,吸取腹腔液,分滴于两片载玻片上,于37℃孵箱中温育30分钟后。用生理盐水漂洗、吹干,丙酮、甲醇溶液(11)固定5分钟,4Giemsa—Wright染液、晾干,油镜观察。每片计100个巨噬细胞,计算吞噬百分数和吞噬指数。

24急性毒理试验

    取小鼠先禁食12小时(不禁水)后,开始实验,给小鼠灌胃100%浓度药液04ml10g,每5小时1次,连续2次,剂量为80gkg,给药后自由饮食,每天上、下午各观察1次,连续l周。

25数据统计

    组间比较采用方差分析。所有数据均以x±s表示,经F'mhe~计软件进行数据的统计分析,P<005时为有显著性差异。

3结果

31蝉花对小鼠免疫功能的影响见表1

 

32蝉花对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响  见表2

 

33急性毒理试验  7天观察结果表明。每天食量及体重基本接近,所有小鼠于给药10分钟后出现轻度镇静、少动、活动减少,24小时后全部恢复正常。其余方面未见异常.以后连续观察至第7天,神经、胃肠、泌尿生殖系统,皮毛,眼等方面均未见异常现象。急性毒理试验表明蝉花最大耐药量为80g/kg,相当于人临床用量444倍。

4讨论

金蝉花滋补强壮,能补助人体正气。扶正祛邪。本实验表明蝉花可显著提高血清溶血素水平,显著提高巨噬细胞的吞噬活性,提示其具有促进免疫功能作用,为今后研究开发蝉花提供了一定的依据。据文献记载。有服用另一品种“小蝉花”(即麦角菌科虫草属真菌小蝉草寄生于蝉科昆虫蟪蛄 platyplure Kaempferi Fabr.幼虫的体内所抽出的子座及寄生幼虫尸体的干燥复合体)引起呕吐多起,故对蝉花进行了急性毒性试验。实验证明蝉花最大耐药量为80g/kg,相当于人用临床量444倍,安全无毒。

 


 
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